Что такое праймеры: Для чего нужен праймер для лица? – Блог NYX

Для чего нужен праймер для лица? – Блог NYX

Праймер — настоящий must have для качественного дневного или вечернего макияжа. Этот косметический продукт наносится под тональную основу и решает 3 основные задачи: фиксирует макияж, защищает лицо и делает эстетический результат более совершенным. Выбирать праймеры нужно с учетом нескольких особенностей — типа кожи, тона, особенностей тургора и микрорельефа. Мы расскажем, зачем нужны такие beauty-средства и как найти идеальное.

Виды праймеров

В первую очередь праймеры различаются по консистенции. Для жирной кожи лица нужны жидкие средства, например, NYX Professional Makeup Shine Killer или гелевый Honey Dew Me Up Primer. Они имеют легкую текстуру, которая создает невесомую основу под мейкап и служит защитным барьером. Проблема кожи этого типа заключается в том, что сальные железы работают слишком активно, а их выделения могут вступать в химические реакции с компонентами косметики, меняя их состав и цвет. Праймер такое развитие событий исключает: макияж не плывет, а воспаления эпидермиса становятся менее выраженными. Зачем отказывать себе в этом?

Для сухой кожи оптимальны праймеры мягкие, кремообразные, например, NYX Professional Makeup Soft Focus Primer. Они более плотные, нежные, благодаря густой текстуре улучшают микрорельеф сухой кожи — скрадывают морщины, увлажняют, подсвечивают.

Для зрелой кожи лица с заметными морщинами и признаками птоза нужны «шелковые» основы под макияж. Они содержат протеины, которые не только устраняют внешние несовершенства, но и улучшают состояние дермы в целом.

Праймеры и консилеры различаются также по базовому тону. Розовые убирают желтизну, зеленые маскируют покраснения, т.е. оптимальны для проблемной, склонной к раздражениям коже. Основы всех ходовых оттенков есть в линии NYX Professional Makeup Color Correcting Liquid Primer.

• силиконовые праймеры — заполняют поры и морщины, создают идеально ровную базу под мэйкап, подходят и для нормальной, и для жирной кожи, могут использоваться как локально, например, для контура губ, так и для всего лица;
• светоотражающие праймеры — содержат микрочастицы со светорассеивающей текстурой, благодаря которым лицо буквально подсвечивается изнутри, холодные тона хорошо подходят для светлой кожи, темные — для загорелой и смуглой;
• минеральные праймеры — универсальный вариант для жирной кожи: матируют, абсорбируют сальные выделения без загрязнения пор, благодаря зеленому подтону скрывают покраснения.

Зачем нужен праймер для лица?

• Благодаря ему пигменты и компоненты косметики не будут проникать внутрь пор, провоцируя их воспаление.
• Основы делают макияж более стойким и исключают искажение цветов.
• Базы любого тона сохраняют нормальный гидро-липидный барьер кожи.
• С помощью праймеров легко скрыть несовершенства кожи, причем как незначительные вроде точечных покраснений, так и серьезные — прыщи, расширенные поры, следы от акне.
• Праймер, как первый слой в одежде, обеспечивает комфорт: даже на очень сухой коже макияж через несколько часов не будет вызывать ощущение стянутости.
• Все основы содержат фильтры, нивелирующие негативное воздействие ультрафиолета и предотвращающие фотостарение.
• База для макияжа в разы упрощает контуринг лица: растушевки и переходы тонов выглядят аккуратными и естественными.
• Праймер увлажняет кожу и при этом сохраняет матовый тон и бархатистую фактуру в течение всего дня.

Консилер или праймер?

У консилеров и основ под макияж есть общая «функция» — маскировать несовершенства кожи. Праймеры готовят кожу к использованию декоративной косметики: они наносятся до тонального крема, выравнивают оттенок, сглаживают морщинки, расширенные поры и шрамы.

Консилеры же применяются локально: прячут темные круги под глазами, маскируют точечные покраснения, пигментные пятна на лице и другие незначительные несовершенства. Такие косметические средства обычно имеют жидкую текстуру, а по тону максимально приближены к естественному цвету кожи. Консилер можно распределять поверх праймера в проблемных зонах.

5 полезных советов для тех, кто учится пользоваться праймером

• Праймер используется только на предварительно подготовленную, чистую кожу.
• Тональный крем наносится после полного высыхания базы, в противном случае он будет скатываться на сырой основе.
• Матирующие праймеры должны быть прозрачными. На лице, склонном к жирному блеску, можно дважды проработать Т-зону, идеальный вариант — бесцветный жидкий NYX Professional Makeup Studio Perfect Primer.
• Базы можно наносить локально: такие средства обычно имеют зеленый тон и предназначены для устранения покраснений и воспалений.
• Основа — это всегда первый слой макияжа.

Качественная основа под макияж — не просто тренд: этот beauty-продукт улучшает состояние кожи и качество мейкапа. Он подходит для использования в течение всего года и совмещается с любыми декоративными косметическими средствами.

Что такое праймер для лица, как его выбрать и наносить правильно

Зачем нужен праймер для лица

Праймер помогает создать дополнительный слой между твоим лицом и макияжем, то есть это настоящая страховка, которая гарантирует, что тональный крем не поплывет через 5 минут после нанесения. Он создает защитный барьер для кожи, а также герметизирует и защищает любые средства для ухода.

В то время, как твой крем смягчает кожу, праймер подготавливает лицо к нанесению макияжа, продливая его жизнь и сохранность в течение дня.

Праймер для лица придет на помощь, если ты недовольна текстурой или пигментацией своего лица. А также, если твоя тональная основа не держится так долго, как хотелось бы.

Праймер для лица способствует более равномерному распределению тонального крема, аккуратной растушевке других продуктов, лучшей стойкости и передаче цвета любого средства макияжа, которое ты используешь на лице. Поэтому ответ на вопрос, зачем нужен праймер для лица, прост: для всего!

Профессиональные визажисты используют праймеры в качестве основы под макияж или же для того, чтобы облегчить текстуру и плотность любого тонального средства. Например, многие смешивают прозрачный матирующий праймер для лица с плотным тональным кремом — так текстура и цвет кожи будет более ровной, а на лице не будет эффекта маски.

Праймерами со светоотражающими частицами можно пользоваться и в качестве хайлайтера. Но это не все функции и виды праймеров.

Праймер для лица делает поры менее заметными, выравнивает текстуру и цвет лица, предотвращает появление жирного блеска, скрывает шелушения и помогает ровнее нанести тональную основу.

Цветные праймеры помогают справиться с неправильной пигментацией кожи. Например, персиковый и желтый маскируют синячки на лице. Зеленый праймер перекрывает красноту, сиреневый — серый оттенок кожи.

Как выбрать праймер для лица по типу кожи

Ориентируйтесь на свой тип кожи, берите в расчет и ее проблемы. Для сухой кожи нужна основа с увлажняющими компонентами, а для жирной нужна база без содержания масел и силиконов.

При расширенных порах пригодится праймер, заполняющий или сужающий их. Обладательницам жирной и комбинированной кожи можно наносить под тональное средство сухой праймер, который заполнит поры и будет впитывать жир и пот, не разрушая при этом макияж.

Девушкам с очень сухой кожей лучше обратить внимание на базы со светоотражающими пигментами — они придадут коже более здоровый, сияющий вид.

Если ты страдаешь от неравномерности тона, выбирай праймер с цветокоррекцией.

Также рекомендуется выбирать праймер, который будет сочетаться с твоей тональной основой. Например, матирующие праймеры редко сочетаются с ВВ, СС и DD-кремами, так как в последних и так есть компоненты, которые выполняют те же функции. Праймеры с силиконами, которые часто используются для нормального типа кожи с расширенными порами, не сочетаются с тональными основами с маслами. Тональный крем не сможет нормально «сцепиться» с кожей и пойдет пятнами. Вот, собственно, и вся инструкция для того, как выбрать праймер для лица. Дело за малым — научиться его использовать.

Как наносить праймер для лица

До праймера используй свой привычный дневной уход, включая солнцезащитное средство. А потом только наноси праймер.

• Используй небольшое количество продукта: горошинки обычно хватает, чтобы полностью покрыть лицо. С праймерами, заполняющими поры стоит помнить, что их наносят только на проблемные участки. То есть, на Т-зону и область на щеках вокруг носа.

• Двигайся от центра к периферии: визажисты рекомендуют все средства для кожи наносить от центра лица, где концентрируется основное внимание. Распределяй праймер тонким слоем круговыми движениями с помощью пальцев или же кисти, но не спонжа — он впитает много продукта.
• Не забывай про зону вокруг глаз: ее тоже нужно подготовить к макияжу. Есть одно НО: не используй матирующий праймер на зоне под глазами, лучше нанеси туда базу для теней.
• Смешай праймер с тональным кремом: так ты сократишь время нанесения мейкапа и получишь более стойкий и естественный макияж. Не смешивай праймеры для цветокоррекции с тональными кремами — только прозрачные или сияющие.

Лучшие праймеры для лица

Maybelline Baby Skin Instant Pore Eraser

около 100 грн

Это один из самых популярных праймеров, и мы можем понять почему. Производители не шутили, когда назвали его «Кожа ребенка», потому что он действительно приводит к этому мягкому бархатному чувству на коже. Праймер заполняет поры, увлажняет кожу и продлевает жизнь твоему макияжу.

Плюсы:

• Легкий и нежирный
• Делает кожу гладкой и увлажненной
• Минимизирует появление морщин
• Удобная для путешествий упаковка
• Доступный

Минусы

• Использование слишком большого количества может привести к жирному ощущению

Benefit POREfessional Face Primer

ок. 1500 грн

Его формула имеет шелковистую текстуру, которая помогает твоей тональной основе легко смешиваться и оставаться на месте в течение всего дня. Если твоя Т-зона очень жирная, он поможет контролировать маслянистость, а также будет держать сальный блеск в страхе.

Этот праймер подходит для всех оттенков лица и настоятельно рекомендуется для жирной, комбинированной и чувствительной кожи.

Плюсы:

• Уменьшает морщины и поры
• Легкий и нежирный
• Подходит для всех типов кожи

Минусы

• Если у тебя сухая кожа, он может не сработать

Lancome La Base Pro Primer

ок. 1000 грн

Праймер ощущается невероятно легким на коже и мгновенно увлажняет, придавая лицу здоровый вид. Если ты боретешься с жирной Т-зоной, эта формула, похожая на сыворотку, контролирует масло и предотвращает ужасный блеск. Кроме того, твой макияж будет длится дольше даже в жаркие дни.

Плюсы

• Легко наносится
• Сглаживает недостатки
• Без масла

Минусы

• Не подходит для очень жирной кожи

Clinique Superprimer

ок. 800 грн

Когда мы говорим о его текстуре, он похож на крем, но это не заставит твое лицо выглядеть или чувствовать себя жирным. Обогащенная антиоксидантами, эта некомедогенная формула отлично подходит для чувствительной кожи, а также делает ее увлажненной и здоровой.

Этот продукт от Clinique — лучший выбор для сухой кожи.

Плюсы:

• Легкий и без масла
• Прошел испытания на аллергию
• Без запаха
• Не сушит кожу

Минусы:

• Не обеспечивает достаточного контроля масла для очень жирной кожи

Не нашла подходящий для себя? Вот еще варианты, среди которых ты точно что-то себе присмотришь!

Maybelline New York GiGi Collection Tinted Primer

Цена — 357 грн

L’Oreal Paris Infaillible Primer Base de Teint

Цена — 211 грн

Benefit The Porefessional Matte Rescue

Цена — 902 грн

Giorgio Armani Fluid Master Primer

Цена — 1226 грн

Yves Saint Laurent Touche Eclat Blur Primer Base De Teint Fluide

Цена — уточнять

Gosh Velvet Touch Prime’n Set Powder

Цена — 638 грн

Tarte Cosmetics Rainforest Of The Sea Radiance Drops

Цена — 863 грн

Для чего нужен праймер и как им пользоваться – советы Dr.

Pierre Ricaud

Для чего нужен праймер?

Это средство имеет несколько названий, которые вы можете встретить: основа под макияж или праймер — термин, пришедший из английского языка.

Праймер для лица — это незаменимое средство для макияжа выполняет несколько функций и позволяет одновременно:

• создать на коже защитную пленку перед нанесением тонального крема, содержащего жирную основу, что может закупорить поры кожи;
• зафиксировать макияж;
• разгладить текстуру кожи за счет сужения пор;
• скрыть недостатки.

Дополнительный совет: основа для макияжа Dr.Pierre Ricaud разглаживают текстуру вашей кожи и подготавливают ее к нанесению основы и вашего любимого макияжа.
Выберите праймер с матирующим или разглаживающим эффектом.
Если у вас комбинированная и жирная кожа, матирующий праймер поможет обеспечить более длительную фиксацию тонального крема.
Хотите, чтобы ваша кожа больше сияла? Тогда выберите тональный флюид-иллюминатор.

Праймер какого цвета выбрать?

Для решения каждой задачи существует свой цвет праймера — техника, также называемая «цветокоррекция».
Итак, выбирайте:

• белый, желтый или бесцветный — для осветления и маскировки недостатков;
• зеленый — для нейтрализации покраснений на светлой коже;
• розовато-лиловую основу под макияж, чтобы сгладить чрезмерно желтый цвет лица;
• праймер синего цвета — для нейтрализации покраснений на смуглой коже;
• карамель — для осветления темной кожи.

Дополнительный совет: для кожи, склонной к покраснению, идеальным решением будут зеленые праймеры. Нанесите средство тонким слоем, тщательно увлажнив кожу. Затем нанесите тональный крем, лучше всего — с помощью кисти.

Есть также основы под макияж для зоны вокруг глаз, которые можно наносить перед нанесением теней.

Как правильно нанести праймер?

Нанесите разглаживающий или увлажняющий праймер после хорошего увлажнения кожи, но перед нанесением тональной основы. Вам решать — нанести его на все лицо или только на определенные участки.

Отдавайте предпочтение кисти (всегда чистой), хотя основу под макияж также можно наносить спонжем или пальцами.

Дополнительный совет: некоторые праймеры выпускаются в виде спрея, что может облегчить их нанесение.

Dr.Pierre Ricaud предлагает разглаживающую и выравнивающую основу для лица антивозрастного действия с эффектом «идеального тона», являющийся отличным решением для вашего макияжа.

Праймер для лица. Для чего нужен и как использовать?

На чтение 5 мин.

Привет всем любителям качественной косметики! Всем нам
нравится, когда кожа выглядит гладкой, ухоженной без каких-либо несовершенств.
Конечно, существуют тональные основы и ББ-кремы, однако они не всегда полностью
могут скрыть несовершенства, а в некоторых случаях даже подчёркивают их.
Поэтому сегодня мы поговорим о праймере. Это именно то средство, которое
поможет справится в данной ситуации. Так что же такое праймер? Какими
свойствами он обладает? Давайте вместе ответим на эти вопросы!

Что такое праймер?

С английского это слово переводится, как «первичный». Как
нетрудно догадаться, праймер наносится на кожу самым первым, является базой под
макияж. Для чего? Всё просто: он является как бы фундаментом для последующих
слоёв косметики, тем самым увеличивает стойкость макияжа. Но и это ещё не всё.
Кроме того, что косметика на Вашем лице будет держаться значительно дольше,
праймер также улучшает вид кожи: она выглядит более ровной и здоровой.

Какими свойствами обладает праймер?

Как мы уже упоминали ранее, праймер является прекрасной
базой под тональник. Он отлично предотвращает макияж от скатывания. Это первое,
но далеко не единственное его свойство.

Основным же свойством праймера является его способность
разглаживать кожу. Продукт невероятно хорошо выравнивает рельеф кожи, устраняя
такие мелкие недостатки, как расширенные поры. При этом, важно отметить, что
праймер не забивает их. За счёт этого тональное средство более равномерно
ложится на кожу, и макияж выглядит более естественным.

Ко всему прочему, праймер может скрывать небольшие
покраснения и пигментацию. Конечно, он не заменит настоящий тональный крем,
однако везучие обладательницы нормальной кожи без проблем могут использовать
только праймер особенно в летний период.

Многие праймеры обладают также индивидуальными и очень даже
неплохими свойствами. Например, есть праймеры, которые защищают кожу от
ультрафиолета, а значит они предотвращают появление первых признаков старения
кожи. Также есть праймеры, содержащие в себе различные полезные вещества. Они
напитывают кожу витаминами, делая её более здоровой.

Читать также:

Консилер: что это и как его выбрать?

Виды праймеров:

Здесь производители по полной «разошлись», если можно так
сказать. Праймеры бывают совершенно разные, с разными свойствами, и, выбирая
подходящий, следует это учитывать.

№1. Сияющий праймер

Такой праймер содержит в себе особые светоотражающие
частицы, которые придают коже желаемое сияние. Лицо выглядит увлажненным,
свежим и здоровым. Но у многих людей эффект такого праймера ошибочно
ассоциируется с жирным блеском, поэтому средство не пользуется особой
популярностью. И очень даже зря. Сияющий праймер делает лицо более отдохнувшим
и светлым.

№2. Кремовый праймер

Если Вы так и не смогли выбрать из всего обилия праймеров
нужный именно Вам, то берите кремовый. Это средство подойдёт абсолютно любому
типу кожи. Оно прекрасно увлажняет и является просто идеальной базой под
макияж: тон ложится легко и равномерно.

№3. Матирующий праймер

Как понятно из названия, такой праймер отлично подойдёт жирной
и проблемной коже. Регулируя работу сальных желез, средство избавляет кожу от
ненавистного жирного блеска, совершенно не забивая при этом поры.

№4. Силиконовый праймер

Не волнуйтесь, силикон не всегда плохо! В данном случае это
даже отлично. Силиконовый праймер бесцветен и предназначен для разглаживания
рельефа лица. Он идеально выравнивает кожу, а также сужает поры. Тональник
ложится равномерно, кожа выглядит гладкой и шелковистой. При выборе
силиконового праймера следует учитывать тип кожи. Средство отлично подойдёт жирной
и возрастной коже, но обладательницам проблемной придётся сразу отказаться от
такого праймера.

№5. Праймер на масляной основе

Такое средство не просто является отличной основой под
макияж. Оно ещё и ухаживает за кожей, делает её более увлажнённой и эластичной,
выравнивает морщинки. Праймер на масляной основе очень универсален. Прекрасно
сочетая в себе и декоративные, и уходовые функции, он благоприятно влияет и на
вид кожи, и на её состояние.

№6. Жидкий праймер

Праймер в виде лосьона обладает невесомой текстурой, что
делает его абсолютно не похожим на другие. Он совершенно не чувствуется на лице
и при этом отлично увлажняет кожу, выравнивает тон. Более всего такое средство
подходит жирной и комбинированной коже.

№7. Зелёный праймер

Единственный праймер, который наносится точечно. Этим он
больше напоминает консилер. Такой праймер идеально скрывает покраснения и
воспаления. С ним кожа точно будет выглядеть гладкой и мягкой.

Выбирая праймер, всегда учитывайте его вид и тип Вашей
кожи! Неправильно подобранное средство может плохо повлиять на Вашу кожу!

Использование праймера:

Для начала следует подготовить кожу к нанесению косметики вообще. Что для этого нужно? Увлажните кожу. Это можно сделать при помощи крема для лица или эмульсии. Для чего это нужно? Так косметика будет наноситься ровно, а макияж дольше держаться.

Следующим шагом мы наносим праймер. Матирующий праймер по
оттенку должен совпадать с кожей. Наносите средство по всему лицу (исключением
является зелёный, им покрывают только проблемные зоны). Сначала выдавите
праймер на ладонь. Теперь влажным спонжем либо кистью круговыми движениями
нанесите на лицо. Равномерно распределяйте от области глаз к носу, щекам, лбу,
подбородку.

Удостоверьтесь, что Вы равномерно нанесли средство на лицо. Особенно обратите внимание на Т-зону. В случае необходимости нанесите праймер повторно постукивающими движениями в проблемных зонах. Подождите, когда средство подсохнет и можете накладывать оставшуюся косметику.

Рекомендуем:

Праймеры — Sileks

Как правильно выбрать праймер

• Если мРНК имеет поли(A) 3′ хвост, то можно использовать праймер oligo-dT для одновременного праймирования всех мРНК.
• Если вы хотите получить кДНК только из подмножества всей мРНК, то можно использовать специфичный для последовательности праймер, который будет связываться только с одной последовательностью мРНК.
• Если вы хотите получить части кДНК, которые были бы разбросаны по всей мРНК, то вы можете использовать случайный коктейль праймеров, который производил бы кДНК из всех мРНК, но эти кДНК не были бы полной длиной.

Основными преимуществами случайного праймирования являются получение более коротких фрагментов кДНК и повышение вероятности того, что 5′-концы мРНК будут преобразованы в кДНК.
Поскольку обратная транскриптаза обычно не достигает 5′-конца длинной мРНК, случайные праймеры могут иметь в этом случае преимущество.

Специфические праймеры

Специфические праймеры, гомологичные конкретной последовательности, обладают наибольшей специфичностью и являются наиболее подходящими из вариантов праймеров для обратной транскрипции. Однако они не обеспечивают гибкости олиго (dT) и случайных праймеров, а это означает, что необходимо проводить отдельную реакцию синтеза кДНК для каждого исследуемого гена. Это делает специфические праймеры менее оптимальными для обработки ограниченных образцов тканей или клеток.

В одностадийных реакциях ОТ-ПЦР всегда используется ген-специфический праймер для синтеза первой цепи кДНК, в то время как двухэтапная ОТ-ПЦР позволяет использовать различные варианты праймеров.

Праймеры Oligo (dT)

Праймеры Oligo (dT) являются предпочтительным выбором для двухэтапных реакций синтеза кДНК из-за их специфичности в отношении мРНК и потому, что они позволяют изучать множество различных мишеней из одного пула кДНК. Однако, поскольку они всегда инициируют обратную транскрипцию на 3´ конце транскрипта, сложная вторичная структура может привести к неполному синтезу кДНК.
Обычно используют несколько типов праймеров олиго (dT).
Олиго (dT)₂₀ представляет собой гомогенную смесь 20-мерных тимидинов, а олиго (dT)_12–18 представляет собой смесь 12-мерных и 18-мерных тимидинов. Также, заякоренные олиго (dT) праймеры предназначены для предотвращения проскальзывания поли(А), обеспечивая их отжиг на стыке 3´UTR / полиА. Пример заякоренного олиго (dT)₂₀ представляет собой смесь праймеров, состоящую из цепочки из 20 остатков дезокситимидиловой кислоты (dT), за которыми следует dV (либо dG, dA, либо dC), а затем dN (dA, dT, dG или dC). Благодаря вариабельной концевой последовательности, праймер прикрепляется к 5′-концу поли (А) хвоста мРНК и предотвращает праймирование внутри поли (А) хвоста.
Выбор лучшего олиго (dT) праймера может частично зависеть от температуры обратной транскрипции. Более термостабильные обратные транскиптазы могут работать лучше с более длинными праймерами, которые остаются более плотно отожженными при повышенных температурах по сравнению с их более короткими аналогами.
Праймеры олиго (dT) не рекомендуются в качестве единственного праймера для синтеза кДНК, если для нормализации в эксперименте ПЦР в реальном времени используется 18S рРНК, поскольку праймер олиго (dТ) не отжигается.

Случайные праймеры

Случайные праймеры отлично подходят для синтеза больших пулов кДНК. Они также идеально подходят для неполиаденилированной РНК, такой как бактериальная РНК, потому что они отжигаются по всей молекуле-мишени.

Использование комбинации случайных и олиго (dT) праймеров может иногда повысить качество данных за счет объединения преимуществ обоих, если они используются в одной и той же реакции синтеза кДНК первой цепи.

Следует помнить, что случайные праймеры используются только в двухэтапных реакциях ОТ-ПЦР.

Что такое праймер для век, и нужен ли он вам?

Как сделать оттенок теней чище и ярче и заставить их держаться целый день, даже если на улице жарко? На это способны праймеры для век, и эти «фокусы» они одинаково хорошо выполняют и с тенями, и с гелевыми подводками, и с другими продуктами для макияжа глаз.

За счет чего работают праймеры для век, и в каких случаях их применение необходимо? На эти и другие вопросы отвечаем вместе с экспертом Posta-Magazine.

Валерия Овчинникова, официальный визажист бренда Bespecial

Что такое праймер для век, и как он работает?

Праймер-база под тени — это средство 2 в 1, которое предназначено, чтобы выровнять тон кожи век и устранить цветовые дефекты (венки, пигментные пятна), а также усилить стойкость и передачу цветов продуктов, которые наносятся после: тени, помадки, лайнеры, гелевые подводки и другие средства.

Какие задачи решает праймер для век?

Подготавливает кожу к нанесению макияжа глаз. Если пропустить этап с праймером-базой, тени могут начать осыпаться, плохо тушеваться или наноситься не очень равномерно. Плюс праймеры для век усиливают пигмент любых теней, сохраняют их яркость и фактурность. Цвет праймера может сразу задать цветовую основу для дальнейшего макияжа глаз, например, если макияж nude, то база должна быть прозрачной или бежевой, если же макияж цветной, то и цвет базы должен сочетаться оттенком с общей композицией макияжа глаз.

Как правильно пользоваться праймером для век?

В зависимости от консистенции праймер можно наносить кистью или подушечками пальцев. Второй вариант более предпочтителен, если для вас важно нанести средство тонким слоем и не допустить появления ни единого комочка.

За счет чего работает праймер для век?

Чаще всего праймеры работают за счет содержания определенного количества силиконов и других стойких компонентов, которые блокируют выработку кожного сала и держат тени в течение всего дня на веке. Использовать в качестве праймера консилер, тональный крем или другие продукты не совсем правильно. Это важно понимать, так как продукты, созданные для других участков кожи лица, могут выполнять абсолютно противоположные функции и содержать компоненты, предназначенные для решения других задач в макияже.

Есть ли у этих продуктов показания и противопоказания к применению?

К противопоказаниям можно отнести индивидуальную непереносимость отдельных компонентов средства, сильную сухость век, которая сопровождается шелушением и связана с обезвоживанием организма или кожными заболеваниями. В этом случае наносить какие-либо косметические средства на глаза не рекомендуется. Нужна база для век, если вам важно, чтобы макияж оставался свежим и ярким в течение всего дня, если вы делаете насыщенный многослойный макияж. И еще несколько ситуаций, когда праймер необходим — это жирная кожа и особое строение кожи век, так называемая «падающая складка», которая часто «съедает» тени и смазывает их.

Праймер для лица. Зачем он нужен?

Появился праймер в начале нашего века и с тех самых пор стал незаменимым средством в арсенале профессиональных визажистов. И уже немало женщин по всему миру включили этот продукт в свой бьюти-ритуал. Тем не менее, многие до сих пор не знают, что такое праймер и для чего он нужен.

Праймер – это продукт, разработанный для создания идеальной базы (основы) под макияж, и наносится он перед тональным кремом или пудрой. Праймеры гарантируют идеальное нанесение тонального средства, заполняя поры и мелкие морщины, маскируя недостатки и делая поверхность кожи более ровной и гладкой. Благодаря праймеру Ваш макияж будет выглядеть свежим в течение длительного времени. Если Вы живете или часто посещаете места с жарким и влажным или холодным и сухим климатом, тогда Вам понадобится праймер, чтобы сделать свой макияж более стойким. Использование праймера значительно облегчает последующее нанесение других средств макияжа и позволяет сократить их расход. Кроме того, праймеры создают некую защиту для нашей кожи, препятствуя глубокому проникновению компонентов декоративной косметики в поры. Многие праймеры сейчас содержат SPF-фильтры, помогая защитить кожу от воздействия солнечных лучей и предотвращая преждевременное старение.

Виды праймера по назначению

Увлажняющие – обеспечивают дополнительное увлажнение для сухой или шершавой кожи.
Матирующие – идеальны для жирной кожи, придают ей матовый вид и сокращают видимые поры, контролируют выработку себума и минимизируют жирный блеск. 
Иллюминирующие – придают яркость и сияние, особенно идеальны для тусклой кожи.
Корректирующие – помогают откорректировать цвет лица. Бывают: прозрачные/нейтральные – подходят для любого типа кожи, помогают сгладить неровности и создают идеальную поверхность для нанесения макияжа; зеленые/мятные – используются, чтобы скрыть покраснения, высыпания или капиллярную сеточку, и наносятся точечно; фиолетовые/сиреневые – предназначены для нейтрализации землистых или желтоватых оттенков кожи; желтые – маскируют синеву, идеальны для темных кругов под глазами; розовые – маскируют следы усталости, придают коже свежесть и сияние.  
Праймер может иметь кремообразную, гелевую, пудровую или жидкую текстуру. Помимо праймеров для лица существуют также базы под помаду, под тени для век и даже под тушь.

MAIKE’ ПРАЙМЕР С КОРРЕКТИРУЮЩИМ ЭФФЕКТОМ INSTANT CORRECTION Продукт, основная функция которого — подготовить кожу лица к нанесению макияжа. Делает поверхность кожи более ровной и гладкой и помогает скорректировать тон. Его неощутимая текстура создает «эффект второй кожи» и является оптимальной базой для всех видов тональных средств. Микросферы гиалуроновой кислоты оказывают подтягивающий и разглаживающий эффект. Летучие силиконы обеспечивают легкое нанесение продукта. ПРОЗРАЧНЫЙ: адаптируется к любому типу кожи и уменьшает дисхромию. ЗЕЛЕНЫЙ: предназначен для нейтрализации красных тонов. Помогает скрыть покраснения, высыпания. ФИОЛЕТОВЫЙ: используется для нейтрализации желтоватых оттенков кожи, а также темных пятен на бронзовых тонах кожи. Солнцезащитные фильтры защищают лицо от UVA/UVB-лучей. ОСОБЕННОСТИ И ЭФФЕКТЫ: Корректирует и выравнивает > содержит гиалуроновую кислоту ПРОФЕССИОНАЛЬНАЯ РЕКОМЕНДАЦИЯ: Нанесите небольшое количество праймера перед тональным кремом, чтобы создать однородную и идеальную базу. Или же используйте как самостоятельный продукт для нейтрализации дисхромии и выравнивания поверхности кожи. — Без парабенов — SPF15 — Дерматологически тестировано

MAIKE’ ПРАЙМЕР С ЭФФЕКТОМ СИЯНИЯ INSTANT GLOW Основа под макияж, которая придает эффект сияния и идеально выравнивает поверхность кожи. Жидкая, легкая и разглаживающая текстура повышает стойкость макияжа. Праймер, который можно использовать по-разному: как самостоятельный продукт для сияющего результата, в качестве иллюминирующей основы перед нанесением тональных кремов или для выделения только некоторых областей лица (дуг бровей, скул). Универсальный оттенок, который подходит для всех типов кожи. Абсолютная яркость, мягкость и комфорт. Содержит «уплотняющее» вещество: оказывает действие, предотвращающее появление морщин, и улучшает тургор. Микросферы морского коллагена: проникают в небольшие морщинки и захватывают воду с поверхности кожи, увеличиваясь в объеме, и в результате оказывают мгновенный заполняющий эффект. В состав праймера также входит специальное активное вещество, которое восстанавливает оптимальный уровень гиалуроновой кислоты, стимулирует ее синтез и обновление: увлажняет как на глубоких слоях, так и на поверхности, делает кожу более эластичной и прочной, заполняет, разглаживает и сокращает морщины. ОСОБЕННОСТИ И ЭФФЕКТЫ: Иллюминирует > улучшает внешний вид > для любого тонального  средства ПРОФЕССИОНАЛЬНАЯ РЕКОМЕНДАЦИЯ: Наносите праймер на отдельные участки для придания естественного эффекта сияния — до, после или совместно с тональным кремом. — Без парабенов — Дерматологически тестировано

Как наносить праймер

Прежде всего, выбирайте праймер, который будет подходить Вашему типу кожи, а также очень важно, чтобы он сочетался с Вашим тональным кремом.

Рекомендации по применению праймера:
1. Всегда наносите праймер на предварительно очищенную и увлажненную кожу. Обязательно дождитесь, пока увлажняющее средство (напр., крем) впитается, остатки уберите с помощью салфетки.
2. Распределяйте праймер по направлению от центра лица к его краям. С нанесением отлично справятся кончики пальцев или же специальная консиллерная кисть.
3. Не используйте слишком много продукта. В данном случае, принцип «чем больше, тем лучше» – не работает.
4. Дайте праймеру полностью высохнуть прежде, чем приступать к нанесению тонального крема или других средств макияжа.

В завершение стоит добавить, что праймер можно использовать не только как основу под тональный крем, но и как самостоятельный продукт – для более естественного макияжа. 

Если уже речь зашла о праймерах, то Вас также может заинтересовать праймер под тушь для объема бренда RevitaLash (США):

Revitalash Volumizing Primer ОСНОВА ПОД ТУШЬ ДЛЯ ОБЪЕМА Volumizing Primer by RevitaLash моментально сделает Ваши ресницы гуще и длиннее, укрепит их и идеально подготовит к нанесению туши. Дарит ресницам восхитительную красоту, а Вашему взгляду волшебную глубину и выразительность. Основа (праймер) под тушь делает ресницы послушными и идеально разглаживает любые неровности ресниц, чтобы сделать нанесение туши максимально эффективным и простым Полностью покрывает ресницы и увеличивает их объем и длину, предотвращает слипание ресниц и размазывание туши. Имеет уникальный глубокий синий оттенок, что придает глазам особенную яркость, усиливает цвет туши. Обеспечивает глубокое увлажнение и питание ресниц, укрепляет и придает им особую мягкости и блеск. СОСТАВ: Пептиды: укрепляют, питают и улучшают внешний вид ресниц Пантенол: увлажняет и придает силу и сияние Полимеры и натуральные растительные экстракты: восстанавливают ресницы, увеличивают естественную длину и густоту Минеральный оттенок: делает цвет туши более глубоким и красивым  ПРИМЕНЕНИЕ: Нанесите основу под тушь Revitalash Volumizing Primer на чистые ресницы. Тщательно покройте ресницы от корней до кончиков с помощью кисточки, подкручивающими движениями. Нанести тушь для ресниц. Для достижения максимального эффекта рекомендуется использовать тушь Revitalash Volumizing Mascara.

Нанесение макияжа декоративной косметикой итальянского бренда MAIKE’

Addgene: Protocol – Как разработать праймеры

Дизайн праймеров для ПЦР

Олигонуклеотидные праймеры необходимы при проведении реакции ПЦР. Необходимо разработать праймеры, комплементарные матричной области ДНК. Они синтезируются химически путем соединения нуклеотидов вместе. Нужно избирательно блокировать и повторно блокировать реактивные группы на нуклеотиде при добавлении нуклеотида по одному. Основное свойство праймеров состоит в том, что они должны соответствовать последовательностям молекулы-матрицы (должны быть комплементарны цепи матрицы).Однако праймеры не обязательно должны полностью соответствовать цепи матрицы; однако важно, чтобы 3′-конец праймера полностью соответствовал цепи матричной ДНК, чтобы можно было продолжить удлинение. Обычно на 3′-конце используется гуанин или цитозин, а 5′-конец праймера обычно имеет участки в несколько нуклеотидов. Кроме того, оба 3′-конца гибридизированных праймеров должны указывать друг на друга.

Размер грунтовки также очень важен. Короткие праймеры в основном используются для амплификации небольшого простого фрагмента ДНК.С другой стороны, длинный праймер используется для амплификации образца геномной ДНК эукариот. Однако праймер не должен быть слишком длинным (> 30-мерных праймеров) или слишком коротким. Короткие праймеры дают неточный, неспецифический продукт амплификации ДНК, а длинные праймеры приводят к более медленной скорости гибридизации. В среднем фрагмент ДНК, который необходимо амплифицировать, должен иметь размер в пределах 1-10 кБ.

Структура грунтовки должна быть относительно простой и не содержать внутренней вторичной структуры во избежание внутренней складчатости.Также необходимо избегать отжига праймеров, который создает димеры праймеров и нарушает процесс амплификации. При разработке, если вы не знаете, какой нуклеотид поместить в определенное положение внутри праймера, можно включить более одного нуклеотида в это положение, называемое смешанным сайтом. Можно также использовать молекулярную вставку на основе нуклеотидов (инозин) вместо обычного нуклеотида для более широких возможностей спаривания.

Принимая во внимание приведенную выше информацию, грунтовки обычно должны обладать следующими свойствами:

• Длина 18-24 основания
• 40-60% содержание G/C
• Начало и конец с 1-2 парами G/C
• Температура плавления (Tпл) 50-60°С
• Пары праймеров должны иметь Tm в пределах 5°C друг от друга

• Пары праймеров не должны иметь комплементарных областей

  Примечание: Если вы будете включать сайт рестрикции на 5’-конце праймера, обратите внимание, что «зажим» из 3–6 пар оснований должен быть добавлен выше, чтобы фермент мог эффективно расщеплять (например,г. GCGGCG-сайт рестрикции-ваша последовательность).

Школа биомедицинских наук Вики

Из Школы биомедицинских наук Wiki

Праймер представляет собой специально разработанную последовательность оснований длиной примерно 18–20 п. н. Праймеры позволяют ДНК-полимеразе начать удлинение ДНК. Праймеры используются в полимеразной цепной реакции (ПЦР) в качестве этапа амплификации короткой последовательности ДНК.Они уникальны, поскольку связываются только с определенным участком ДНК, где транскрипция ДНК начинается с 5′ до 3′. Поскольку праймеры широко используются в полимеразной цепной реакции (ПЦР), эта характеристика праймеров полезна для предотвращения загрязнения другой ДНК из других источников, и может быть амплифицирована конкретная область желаемой ДНК.

Праймер — это короткая последовательность нуклеотидов, используемая при синтезе ДНК. Праймеры необходимы для функционирования ДНК-полимеразы, поскольку фермент может встраивать нуклеотиды только в существующую цепь ДНК.Они синтезируются ферментом Primase и комплементарны по основаниям одноцепочечной ДНК-матрице с 3′-ОН-концом ^[1] . Праймеры представляют собой короткие молекулы РНК в живых клетках, однако ДНК служит праймером в неживых клетках ( in vitro ), например, в ПЦР ^[2] . ДНК-полимераза I играет важную роль в процессе репликации, удаляя РНК-праймер во время корректурного считывания ^[3] . Процедура ПЦР требует 3 различных температур для выполнения 3 важных этапов.во-первых, нити ДНК должны быть денатурированы для образования одиночных цепей при 94 ° C, во-вторых, охлажденная одноцепочечная ДНК отжигается до праймеров при 55 ° C и, наконец, синтез и удлинение вновь образованных цепей ДНК с использованием полимеразы TAQ при 74 ° C. . Различные грунтовки имеют немного разные температуры отжига. Точность и специфичность рекомендаций ПЦР зависят от используемого праймера и концентрации Mg2+ для отображения точной температуры отжига, что позволяет сформировать правильный продукт ПЦР.

Дизайн грунтовки

Праймеры содержат от 18 до 30 оснований в зависимости от генома. Чем длиннее геном, который вы собираетесь клонировать, тем длиннее праймер. Чем длиннее праймер, тем больше несоответствий он может допустить. Температура плавления должна быть около 60-65°C, так как это температура отжига для праймеров в ПЦР. Это зависит от используемых нуклеотидных оснований и длины праймера и может быть рассчитано по следующему уравнению:

T _m = (4xG/C) + (2xA/T)
G или Cs на 3′-конце праймера необходимы, поскольку они являются стабильными основаниями и не склонны к несоответствию так легко, как T и А.Следует избегать вторичных структур в праймере и ДНК-мишени, таких как стержневые петли или выпуклости, поскольку они плохо инициируют целевую последовательность DMA.

Также важно избегать гибридизации праймеров, так как это может привести к самоамплификации праймеров. Это называется праймер-димер.

В настоящее время для оптимального проектирования грунтовки используются вычислительные подходы.

Каталожные номера

1. ↑ Берг, Дж. и др. , (2007), Биохимия, 7-е издание, Нью-Йорк, WH Freeman.Страница 852
2. ↑ Хартл Д. и Джонс В., (2009), Генетика; Анализ генов и геномов, 7-е издание, издательство Садбери, Джонс и Бартлетт. Страница 56
3. ↑ Берг, Дж. и др. , (2007), Биохимия, 7-е издание, Нью-Йорк, WH Freeman. Страница 864

Что такое олиго?

Выберите страну / регион *

Выберите страну / regionUnited StatesCanadaAfghanistanAlbaniaAlgeriaAmerican SamoaAndorraAngolaAnguillaAntarcticaAntigua и BarbudaArgentinaArmeniaArubaAustraliaAustriaAzerbaijanBahamasBahrainBangladeshBarbadosBelarusBelgiumBelizeBeninBermudaBhutanBoliviaBosnia и HerzegovinaBotswanaBouvet IslandBrazilBritish Индийского океана TerritoryBrunei DarussalamBulgariaBurkina FasoBurundiCambodiaCameroonCape VerdeCayman IslandsCentral африканского RepublicChadChileChinaChristmas IslandCocos (Килинг) IslandsColombiaComorosCongoCongo, Демократической Республика ofCook IslandsCosta RicaCote D’IvoireCroatiaCubaCyprusCzech RepublicDenmarkDjiboutiDominicaDominican RepublicEast TimorEcuadorEgyptEl SalvadorEquatorial GuineaEritreaEstoniaEthiopiaFalkland остров (Мальвинские острова)Фарерские островаФиджиФинляндияПремьер Югославская Республика МакедонияФранцияФранцузская ГвианаФранцузская ПолинезияФранцузские Южные ТерриторииГабонГамбияГрузияГерманияГанаГибралтарГрецияГренландияГренадаГваделупаГуамГватемалаГуин eaGuinea-BissauGuyanaHaitiHeard и McDonald IslandsHoly Престол (Ватикан) HondurasHong KongHungaryIcelandIndiaIndonesiaIran (Исламская Республика) IraqIrelandIsraelItalyJamaicaJapanJordanKazakstanKenyaKiribatiKorea, Корейские Народно-Демократической RepKorea, Республика ofKuwaitKyrgyzstanLao Народный Демократической RepLatviaLebanonLesothoLiberiaLibyan Arab JamahiriyaLiechtensteinLithuaniaLuxembourgMacauMadagascarMalawiMalaysiaMaldivesMaliMaltaMarshall IslandsMartiniqueMauritaniaMauritiusMayotteMexicoMicronesia, Федеративные StatesMoldova, Республика ofMonacoMongoliaMontserratMoroccoMozambiqueMyanmarNamibiaNauruNepalNetherlandsNetherlands AntillesNew CaledoniaNew ZealandNicaraguaNigerNigeriaNiueNorfolk IslandNorthern Mariana IslandsNorwayOmanPakistanPalauPanamaPapua Нового GuineaParaguayPeruPhilippinesPitcairnPolandPortugalPuerto RicoQatarReunionRomaniaRussian FederationRwandaSaint HelenaSaint Киттс и НевисСент-ЛюсияСент-Пьер и МикелонСамоаСан-МариноСао-Томе и ПринсипиСаудовская АравияСенегалСейшельские острова ierra LeoneSingaporeSlovakiaSloveniaSolomon IslandsSomaliaSouth AfricaSpainSri LankaSth Georgia & Sth Sandwich Институт социальных Винсент и GrenadinesSudanSurinameSvalbard и Ян MayenSwazilandSwedenSwitzerlandSyrian Arab RepublicTaiwan, провинция ChinaTajikistanTanzania, Объединенная Республика ofThailandTogoTokelauTongaTrinidad и TobagoTunisiaTurkeyTurkmenistanTurks и Кайкос IslandsTuvaluUgandaUkraineUnited Арабские EmiratesUnited KingdomUruguayUS Малые отдаленные IslandsUzbekistanVanuatuVenezuelaVietnamVirgin острова (Британские) Виргинские острова (U. S.)Острова Уоллис и ФутунаЗападная СахараЙеменЮгославияЗамбияЗимбабве

Сравнение праймеров ДНК и РНК:

Праймеры в молекулярной биологии используются в качестве отправной точки в синтезе ДНК, in vitro , а также in vivo .

ДНК-праймер используется в ПЦР-амплификации, тогда как РНК-праймер является основным компонентом репликации.

В Интернете доступно множество материалов по обеим темам, но, сравнивая праймер ДНК с праймером РНК, мы можем понять это очень хорошо.

Но перед этим, 

Давайте начнем с основ, 

Репликация ДНК необходима для копирования генетического материала, унаследованного в дочерних клетках. Процесс репликации является ферментозависимой каталитической реакцией, в которой для этого используется множество белков.

С другой стороны, 

ПЦР также используется для синтеза ДНК, но этот процесс зависит от температуры. Он амплифицирует миллионы копий ДНК в целях исследования.

Основной целью обоих процессов является синтез новой ДНК.

Оба процесса требовали нуклеотидов, ДНК-полимеразы и праймера в качестве основных ингредиентов для копирования ДНК.

Прочтите статьи по теме:

Однако для амплификации с помощью ПЦР также требуется несколько других химических веществ и ингредиентов.

ДНК-полимераза выполняет одну из важных функций при синтезе ДНК, добавляя нуклеотиды к растущей полинуклеотидной цепи.

Интересно, что полимераза, используемая в ПЦР, не является обычной, это особый тип фермента, который устойчив к температуре, называемый ДНК-полимеразой Taq.

Работает даже при более высокой температуре. Узнайте больше о ДНК-полимеразе Taq: Функция ДНК-полимеразы Taq в ПЦР

Но для удлинения полинуклеотидной цепи каждой полимеразе требуется короткий участок одноцепочечной нуклеиновой кислоты, который обеспечивает свободную 3′-группу ОН.

Функционально ДНК-полимераза отличается от РНК-полимеразы. Поскольку ДНК-полимеразе требовалась отправная точка, свободный конец 3’ОН, с которого она начинает полимеризацию, образуя фосфодиэфирную связь.

В ПЦР свободная 3’-ОН группа обеспечивается праймером ДНК.

В настоящей статье мы сравниваем эти два разных типа праймеров, используемых в синтезе ДНК.

Прежде всего, РНК-праймер не имеет значения для ПЦР-амплификации. Однако это необходимо для процесса репликации.

РНК-праймер представляет собой короткий участок нуклеиновой кислоты, состоящий из одноцепочечной молекулы РНК.

РНК-полимераза, называемая ДНК-примазой, синтезирует короткий участок одноцепочечной молекулы РНК для начала репликации.

Очень важно, чтобы ДНК-полимераза начала свою каталитическую активность.

Одноцепочечный РНК-праймер обеспечивает свободную 3’-группу ОН, необходимую для ДНК-полимеразы. См. изображение,

Праймеры РНК бывают двух типов, используемых в репликации. Один, который запускает репликацию ДНК и имеет длину примерно от 10 до 18 нуклеотидов на ведущей цепи.

В то время как другие используются для синтеза фрагментов Окадзаки, и они имеют длину от 8 до 10 нуклеотидов на отстающей цепи.

Почему репликация зависит от праймера РНК, а не праймера ДНК?

Ответ здесь,

Единственная РНК-полимераза доступна для синтеза одноцепочечной РНК, поэтому в репликации используется не ДНК, а РНК.

И, наконец, за счет экзонуклеазной активности ДНК-полимеразы удаляются РНК-праймеры, одновременно полимераза заполняет пробел комплементарными нуклеотидами и запечатывает ДНК-лигазой.

Для этого ДНК-полимераза отслеживает и находит праймер РНК, который на самом деле не является частью нашей цепочки ДНК.

(ДНК-лигаза заполняет промежуток между соседними нуклеотидами, образуя фосфодиэфирную связь.)

Экзонуклеазная активность ДНК-полимеразы от 3’ до 5’ удаляет его.

Примечание: для репликации ДНК используется только один тип РНК-праймера.

Интересный факт:

ДНК-полимераза может удлинять полинуклеотидную цепь, но не может синтезировать ее напрямую (ей нужен свободный 3’-конец).

Это может сделать только РНК-полимераза, поэтому в репликации используется РНК-праймер.

Существует разница между синтезом и удлинением цепочек нуклеотидов, см. изображение ниже,

Как и РНК-праймеры, ДНК-праймеры также используются для синтеза ДНК.

Искусственно синтезированные ДНК-праймеры используются для амплификации ДНК в ходе реакции ПЦР.

Это одноцепочечная молекула ДНК длиной от 12 до 25 нуклеотидов.

Здесь РНК-праймеры не могут работать эффективно, потому что они менее стабильны, чем ДНК-праймеры.

Примечательно, что для амплификации двухцепочечной ДНК используется пара праймеров ДНК, один для смысловой цепи ДНК, называемый прямым праймером, и один для антисмысловой цепи ДНК, называемый обратным праймером.

И прямой, и обратный праймер связываются таким образом, что ДНК-полимераза Taq добавляет нуклеотиды внутрь. См. изображение: 

Критерии выбора ДНК-праймера: 

Мы рассмотрели целую статью о том, как разрабатывать ДНК-праймеры для ПЦР. прочтите это здесь: руководство по разработке праймеров для ПЦР.

В целом ДНК-праймер, используемый в ПЦР, должен обладать следующими свойствами:

• Длина от 12 до 20 нуклеотидов (для нормальной ПЦР)
• Менее или от 45 до 50% содержания GC
• Меньше способности образовывать шпильки
• Температура отжига от 55 до 65°C

Примечание:

Мы используем ДНК-праймеры только для целей амплификации, поэтому нет необходимости в корректуре или экзонуклеазной активности.

ДНК-праймеры более стабильны, чем РНК-праймеры, и даже не разрушаются при более высокой температуре.

Полимераза…

Основная функция праймера — обеспечить соединение или субстрат для работы ДНК-полимеразы и проведения полимеризации.

Хотя полимеразы, используемые при репликации, а также при амплификации, различаются.

Используемая при амплификации полимераза стабильна при более высокой температуре и не обладает экзонуклеазной активностью.

В то время как полимераза, используемая в репликации, не может работать при более высокой температуре и обладает 3’-5’- и 5’-3’-экзонуклеазной активностью.

Экзонуклеазная активность необходима для корректировки всей последовательности после репликации, и она удаляет все до единого несовпадающие нуклеотиды из вновь синтезированной цепи ДНК.

см. Образ корректора:

Быстрый резюме между РНК Грунтовка и ДНК Грунтовка:

РНК Грунтовки
9
, используемые в репликации ДНК ( in vivo )	Используется для амплификации ДНК во время ПЦР ( in vitro )
Полинуклеотидная цепь из 10–12 олигонуклеотидов	Полинуклеотидная цепь из 12–22 олигонуклеотидов
Стабильна при более высокой температуре 9154 Нестабильна при более высокой температуре 902
Удалены после завершения репликации с помощью экзонуклеазной активности	остается частью вновь синтезированной ДНК,
Синтезированная ДНК Primase	Синтезированная искусственно
Одной молекулы одноцепочечной РНК используется	Пара одноцепочечной ДНК, один прямой праймер и один обратный праймер используется для двух разных одноцепочечных мишеней.
Аденин, гуанин, цитозин и урацил присутствуют в праймере РНК	Аденин, гуанин, цитозин и тимин присутствуют в праймере ДНК

Читать интересную статью: , Applications And Branches 

Праймеры являются очень важным компонентом в молекулярно-генетических инструментах, таких как ПЦР или секвенирование ДНК. Инструменты разработки праймеров, такие как Primer 3, помогают исследователям эффективно разрабатывать праймеры для проведения ПЦР.

Ознакомьтесь с нашим руководством по разработке праймера для ПЦР.

Как использовать праймер для макияжа как профессиональный визажист

Ниже приведены подробные сведения о том, как подписаться на печатное издание Allure, чтобы узнать больше о косметических процедурах, рекомендациях и функциях.

Несмотря на то, что косметические бренды выпускают праймеры для макияжа уже целую вечность, они по-прежнему остаются одним из самых загадочных и загадочных базовых продуктов на рынке. Доступен такой широкий спектр различных вариантов праймера — увлажняющий, матирующий, размывающий, сияющий и т. д. — может быть очень сложно понять, какой тип праймера подойдет именно вам.Ах да, и еще есть фактор применения. Да видимо там это неправильный способ нанесения грунтовки. Если замешательство и разочарование являются основными причинами, по которым вы избегаете учебника для начинающих, мы здесь, чтобы изменить это. Впереди вы найдете профессиональные советы о том, как правильно его использовать, рекомендации для каждого типа кожи, и что вы должны никогда не делать, когда дело доходит до этого базового продукта.

1. Что такое грунтовка и что она делает?

Проще говоря, праймер — это именно то, что следует из его названия: это подготовительный продукт, который наносится после вашего ухода за кожей, чтобы создать идеальную основу для последующего нанесения любого макияжа — например, тонального крема, тонирующего увлажняющего крема или консилера. Ваш праймер может быть в виде сыворотки для лица с добавлением гиалуроновой кислоты, которая усиливает увлажнение, солнцезащитного крема, который защищает и смягчает внешний вид пор, или традиционного праймера на основе силикона (смотрим на вас, Smashbox), который разглаживает и растушевывает.

Стоит отметить, что новейшие праймеры не только разглаживают кожу, сохраняют стойкость макияжа и почти незаметно скрывают поры. Они также могут осветлить, разгладить тонкие линии и морщины, бороться с прыщами и добавить тонны влаги. Некоторые могут даже временно подтянуть кожу, не чувствуя тяжести.

Вывод: если вы сомневаетесь, нужна ли вам в жизни база под макияж, просто спросите себя, насколько вы довольны внешним видом, ощущениями и завершением макияжа лица. Если чего-то не хватает или чего-то не хватает — может быть, вы хотите добавить больше общего сияния или подровнять блеск вашей Т-зоны — праймер может быть именно тем, что вам нужно.

НЬЮ-ЙОРК, Нью-Йорк — 11 СЕНТЯБРЯ: Модель делает макияж за кулисами во время показа мод Дженни Пэкхем во время Недели моды в Нью-Йорке в сентябре 2016 года в Skylight на станции Мойнихан в Нью-Йорке 11 сентября 2016 года. (Фото Криса Коннора/FilmMagic) Getty Images

2. Как лучше всего их применять?

В отличие от продуктов, закрепляющих макияж, таких как закрепляющая пудра или фиксирующие спреи, праймеры почти всегда наносятся после последнего этапа ухода за кожей и перед макияжем. Что касается нанесения, визажисты Аллан Авенданьо, Мэри Филлипс и Робин Блэк рекомендуют использовать пальцы для нанесения праймера, поскольку они говорят, что это лучший и самый простой способ смешать все и получить безупречный результат.«Кисть для макияжа просто перетащит праймер», — говорит Филлипс, добавляя: «Если вы гермофоб, вы всегда можете использовать слегка влажную губку Beautyblender».

Primer-BLAST: инструмент для разработки целевых праймеров для полимеразной цепной реакции | BMC Bioinformatics

Пользовательский интерфейс

Интерфейс состоит из нескольких разделов, в которых пользователи могут вводить шаблон ПЦР и/или уже существующие праймеры, а также другие настраиваемые пользователем параметры (рис. 1).

Рисунок 1

Веб-интерфейс Primer-BLAST.

Пользователи могут создавать новые пары праймеров, вводя только шаблон ДНК, или они могут создавать один праймер, вводя шаблон и другой уже существующий праймер. Primer-BLAST может проверять специфичность уже существующих праймеров с матрицей или без нее. Шаблон ПЦР может представлять собой необработанную последовательность ДНК в формате FASTA или доступ NCBI. Если доступно, рекомендуется использовать RefSeq, так как он содержит больше информации о последовательности [15], что позволяет Primer-BLAST лучше идентифицировать шаблон и, таким образом, выполнять более качественную проверку специфичности праймера.Primer-BLAST также выполняет быструю проверку любой входной необработанной последовательности, чтобы определить, является ли она точным совпадением с последовательностью RefSeq, и в этом случае Primer-BLAST будет использовать присоединение RefSeq в качестве шаблона. Длина шаблона ограничена 50 000 баз. Для более длинных шаблонов следует использовать диапазон праймеров (правый верхний угол рисунка  1), чтобы ограничить длину.

Primer-BLAST также предлагает возможность создания праймеров на основе структуры экзон/интрон, чтобы ПЦР-амплификация могла быть лучше нацелена на мРНК.Пользователи могут указать, должен ли праймер охватывать соединение экзон/экзон с регулируемым количеством оснований на каждой стороне соединения, и должна ли пара праймеров охватывать интрон, а также указать размер интрона. Поскольку этот параметр зависит от точной аннотации границы экзона/экзона, требуется доступ RefSeq (в качестве шаблона ПЦР), поскольку RefSeq представляет лучшую курируемую категорию последовательностей в NCBI.

Доступно несколько вариантов баз данных для проверки специфичности с широким охватом организмов.Они включают базу данных мРНК RefSeq и базу данных генома RefSeq, которые по состоянию на 18 ноября 2011 г. содержат 226 и 7546 организмов соответственно. Эти базы данных не являются избыточными, поскольку они не содержат одни и те же области последовательностей, охватываемые более одного раза, что позволяет лучше проверять специфичность. Они являются предпочтительными базами данных для разработки новых целевых праймеров. Традиционная база данных nr, содержащая избыточные записи, также доступна и в основном рекомендуется для организмов, которые не охвачены другими базами данных, или для записей последовательностей, не охваченных базами данных RefSeq.

Primer-BLAST предлагает гибкие варианты жесткости специфичности. Пользователи могут указать количество несовпадений, которое должна иметь пара праймеров с непредусмотренными мишенями, а также 3’-концевой участок, где должны присутствовать эти несоответствия. Кроме того, пользователи могут указать пороговое значение несоответствия, выше которого любые мишени следует игнорировать (т. е. отфильтровывать мишени, имеющие слишком много несоответствий, чтобы их можно было рассматривать для неспецифической амплификации). Настройки специфичности по умолчанию таковы, что по крайней мере один праймер (для данной пары праймеров) должен иметь два или более несовпадения с непредусмотренными мишенями в последних пяти основаниях на 3′-конце, и что любые мишени с шестью или более несовпадениями по крайней мере с одним праймер (для данной пары праймеров) следует игнорировать.

Не всегда возможно создать праймеры, специфичные для конкретного сплайс-варианта мРНК, когда различия в экзонах недостаточно, чтобы отличить один от остальных. Таким образом, Primer-BLAST предлагает возможность обработки вариантов сплайсинга, которая позволяет амплифицировать другие варианты того же гена.

Другие параметры, включая параметры чувствительности поиска BLAST, свойства исключения SNP и праймера и т. д., можно найти в разделе «Дополнительные параметры».

Представление результатов

На странице результатов представлена ​​специфичность сгенерированных праймеров, графическая сводка пар праймеров по отношению к шаблону ПЦР и некоторым характеристикам, таким как экзоны, а также подробная информация о каждой паре праймеров. Он покажет только целевые праймеры, если они будут найдены; в противном случае он сообщит обо всех праймерах. Во всех случаях фактические мишени будут перечислены вместе с подробным сопоставлением между праймерами и мишенями.

В качестве примера, иллюстрирующего функциональность Primer-BLAST, мы разрабатываем праймеры с использованием транскрипта варианта 5 мРНК белка цинковых пальцев человека 419 (ZNF419) (номер доступа Genbank NM_001098494). Как показано на рисунке  2, согласно отчету NCBI Gene существует семь вариантов транскриптов гена ZNF419.В поиске использовались значения по умолчанию, которые требуют, чтобы по крайней мере один праймер (для данной пары праймеров) имел два или более несоответствия непреднамеренным мишеням в последних пяти основаниях на 3′-конце. Проверка специфичности проводилась по базе данных мРНК NCBI RefSeq с организмом, ограниченным человеком, поскольку целью было найти пары праймеров, специфичных для этого транскрипта, только среди человеческого транскриптома. Чтобы избежать возможной амплификации геномной ДНК, выбран параметр «Праймер должен охватывать экзон-экзонное соединение».Как показано на рисунке  3, Primer-BLAST успешно возвратил пять определенных пар праймеров, и показано подробное выравнивание между мишенями и праймерами. В процессе поиска Primer-BLAST изучил в общей сложности 355 744 совпадения BLAST (см. условные обозначения на рис. 3), которые представляют собой не только варианты транскриптов этого гена, но и большое количество транскриптов других генов, которые демонстрируют совпадения в той или иной степени с кандидатом. грунтовки. Это подчеркивает проблему, если такое же тщательное исследование специфичности праймеров будет выполняться вручную.Среднее время поиска для создания новых праймеров с параметрами по умолчанию с использованием матрицы мРНК человека средней длины (2800-3000 оснований) составляет 2,6 минуты.

Рисунок 2

Схематическое выравнивание вариантов транскриптов мРНК гена ZNF419. Цифры обозначают конечные позиции экзонов для варианта 5. Красные линии обозначают участки праймеров, выбранные с помощью Primer-BLAST. Обратите внимание, что несколько транскриптов различаются на 3 нуклеотида из-за использования немного разных сайтов сплайсинга, даже если они имеют одни и те же экзоны (т.д., вариант 2 в.с. вариант 1, вариант 7 в.с. вариант 6 и вариант 4 против вариант 3). График адаптирован из отчета NCBI по генам (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/sites/entrez?db=gene&cmd=Retrieve&dopt=full_report&list_uids=79744. Данные получены 02.11.2011).

Рисунок 3

Пример результатов разработки целевых праймеров. Обратите внимание, что несмотря на то, что были возвращены пять пар праймеров (как показано на графике), из-за нехватки места на рисунке показаны детали только для первой пары праймеров.Ссылка «Сводка поиска» при нажатии показывает используемые параметры поиска, а также общее количество обращений BLAST, сгенерированных в процессе поиска (355 744 совпадения для текущего поиска). Числа в выравниваниях указывают начальную и конечную позиции для праймера и мишени. Точка (.) указывает на идентичность нуклеотида последовательности праймера. Поиск производился 02.11.2011.

Изучение выравнивания варианта транскрипта 5 с другими вариантами показывает, что наличие экзона 2 и отсутствие экзона 4 в сочетании являются единственными особенностями, которые отличают его от остальных (рис. 2).Неудивительно, что часть или все прямые праймеры, отобранные с помощью Primer-BLAST, расположены в экзоне 2, а все обратные праймеры находятся на стыках между экзонами 3 и 5 (поскольку экзон 4 отсутствует).

Primer-BLAST также можно использовать для проверки специфичности уже существующих праймеров. Например, мы получили праймеры для той же ПЦР-матрицы, что и выше (т. е. мРНК варианта 5 транскрипта ZNF419), из PrimerBank, который хранит множество предварительно рассчитанных геноспецифических праймеров для обнаружения мРНК [16]. Опять же, использовались параметры специфичности по умолчанию, и результат представлен на рисунке 4. В результате поиска было получено 11 236 совпадений BLAST из базы данных мРНК RefSeq с организмом, ограниченным человеческим, что еще раз иллюстрирует сложность ручной проверки результатов BLAST даже для одной пары праймеров. Эта пара праймеров действительно показывает идеальное совпадение с вариантом 5 транскрипта гена ZNF419, а также с другими вариантами транскрипта того же гена и может генерировать ампликон из 444 оснований. Это согласуется с критериями отбора PrimerBank, согласно которым праймеры специфичны только на уровне генов, а не на уровне транскриптов.Интересно, что обнаруживаются и некоторые другие потенциальные ампликоны. Один из них представляет собой дополнительный ампликон из 780 оснований, присутствующий в предполагаемом транскрипте ZNF419. Другой представляет собой ампликон из 444 оснований из другого гена (т. е. белок цинкового пальца человека 773, номер доступа Genbank NM_198542.1). Однако существует до 5 несоответствий между по крайней мере одним из праймеров и мишенями, что, вероятно, достаточно для предотвращения интерференции амплификации или неспецифической амплификации. Тем не менее, пользователи могут тщательно изучить этот результат и сделать выводы на основе собственного экспериментального опыта.

Рисунок 4

Проверка специфичности уже существующих праймеров. Этот поиск был выполнен путем ввода прямого и обратного праймеров без ввода какого-либо шаблона. Праймеры (прямой праймер: GTAGGACTGCTCAGTTCAAACAT, обратный праймер: ACAGTTACTACACCCGTAAGGC) были получены из PrimerBank (http://pga.mgh.harvard.edu/primerbank/) 02.11.2011 с использованием варианта 5 транскрипта ZNF419 (номер доступа GenBank NM_001098494). Хотя результаты показали, что все 7 вариантов транскриптов гена ZNF419 имеют одинаковые ампликоны, на этом рисунке показаны подробности только для вариантов 1 и 5 из-за ограничения места.Текущий поиск сгенерировал 11 236 результатов BLAST (сделано 02.11.2011).

Сравнение с другими инструментами для проектирования грунтовок

Primer-BLAST предлагает ряд функций, недоступных в других программных инструментах. В Таблице 1 дается краткий обзор этих характеристик, многие из которых важны для различных требований к дизайну праймеров и позволяют пользователям изучить детали специфичности праймеров. Например, Primer-BLAST — это единственный инструмент, который предлагает возможность указать количество несовпадений, которое должна иметь конкретная пара праймеров с непреднамеренными мишенями, и пользовательский 3’-концевой участок, в котором должно присутствовать определенное количество несоответствий.Эта опция важна для удовлетворения различных требований пользователей к строгости специфичности праймеров, поскольку специфичность праймера обычно оценивается по количеству несовпадений, которые он имеет с непреднамеренными мишенями (большее количество несовпадений обеспечивает большую специфичность), и местоположениям таких несоответствий (несоответствия). ближе к 3′-концу предлагают больше специфичности). Primer-BLAST — единственная программа из трех, которая будет размещать праймеры на разных экзонах (т. е. охватывать интрон), чтобы избежать амплификации геномной ДНК, а также единственная, позволяющая настраивать количество совпадений нуклеотидов с обеих сторон соединение экзон/экзон.Кроме того, Primer-BLAST представляет подробные сведения о сопоставлении между найденными праймерами и мишенями.

Таблица 1
Сравнение выбранных функций различных инструментов проектирования праймеров

Еще одним преимуществом Primer-BLAST является его высокая чувствительность обнаружения. Как показано выше, Primer-BLAST по умолчанию способен обнаруживать потенциальные мишени для амплификации, которые имеют до 5 несовпадений с праймером. Primer-Blast достигает этого результата, используя высокочувствительные параметры BLAST, а также дополнительный алгоритм глобального выравнивания NW для обеспечения полного выравнивания между праймером и его целью.Однако одно предостережение заключается в том, что алгоритм BLAST [6] требует минимального совпадения нуклеотидов (размера слова) между запросом и целью, и любые инструменты, использующие BLAST в качестве алгоритма поиска, подвержены этому ограничению. Следовательно, Primer-BLAST (с параметрами по умолчанию) пропустит любые цели, которые имеют 6 или менее последовательных совпадений с праймером (поскольку Primer-BLAST по умолчанию использует размер слова 7). Например, если у мишени есть несовпадения с праймером из 20 оснований в позициях 7 и 14 (при условии, что 5′-конец является первой позицией), мишень будет пропущена Primer-BLAST (с параметрами по умолчанию), даже если она имеет только 2 несоответствия.Предполагая случайное распределение местоположений несоответствия, можно рассчитать количество возможных расположений из 18 совпадений и 2 несовпадений. Существует 20*19 различных способов разместить 2 несовпадения среди 18 совпадений, но только 2 из них приводят к размеру слова меньше 7, поэтому вероятность пропуска цели с 2 несовпадениями с праймером из 20 оснований равна 2/ (20*19) или примерно 0,5%.

Затем мы сравним чувствительность обнаружения цели между Primer-BLAST и другими инструментами для разработки праймеров, такими как QuantPrime и PRIMEGENS. В идеале сравнение чувствительности обнаружения должно заключаться в непосредственном тестировании модулей проверки специфичности во всех инструментах с использованием праймеров, созданных третьей стороной (например, праймеров, созданных Primer3). К сожалению, эта опция недоступна, поскольку Primer-BLAST — единственный инструмент, предлагающий прямую проверку специфичности (т. е. проверку специфичности уже существующих праймеров). В качестве альтернативы мы использовали QuantPrime и PRIMEGENS для разработки целевых праймеров, а затем использовали Primer-BLAST для проверки этих праймеров на наличие потенциальных мишеней.Если Primer-BLAST не находит мишеней, отличных от намеченной (т. е. саму исходную матрицу мРНК), то можно сделать вывод, что QuantPrime и PRIMEGENS по крайней мере так же чувствительны, как Primer-BLAST. С другой стороны, наличие непреднамеренных целей, обнаруженных Primer-BLAST, указывает на то, что эти инструменты не так чувствительны, как Primer-BLAST в отношении чувствительности обнаружения целей (поскольку эти инструменты уже исследовали такие цели, но не могли избежать их во время их выбора). процессы для целевых праймеров).

Тестовые шаблоны выбираются случайным образом из базы данных мРНК NCBI Refseq и включают 52 последовательности человека для тестирования QuantPrime и 24 последовательности Arabidopsis thaliana для тестирования PRIMEGENS (поскольку PRIMEGENS не поддерживает последовательности человека). Как показано в Таблице 2, QuantPrime или PRIMEGENS создали пары праймеров для большинства тестовых случаев, которые они считали специфичными для входных шаблонов. Однако Primer-BLAST показал, что многие из них (13,4% пар праймеров из QuantPrime и 43,3% пар праймеров из PRIMEGENS) имеют потенциальные непреднамеренные мишени, которые демонстрируют несовпадение от одного до пяти нуклеотидов.В результате большая часть тестовых случаев содержит по крайней мере одну пару праймеров с потенциальными непредусмотренными мишенями (31,5% для QuantPrime и 93,3% для PRIMEGENS). Некоторые мишени имеют только одно или два несовпадения с праймерами, полученными из QuantPrime (18,5%), хотя эта часть намного меньше для PRIMEGENS (3,4%).

Таблица 2
Сводка потенциальных непреднамеренных целей для пар праймеров, о которых сообщают QuantPrime и PRIMEGENES
^a

На рис. 5 подробно показаны 5 потенциальных непреднамеренных целей.Например, QuantPrime создает две пары праймеров (пример 1 и 2), которые разработаны специально для образцов Genbank NM_182690.2 и NM_001039567.2 соответственно (рис. 5). Однако Primer-BLAST показывает, что эти две пары имеют потенциальные непреднамеренные мишени, NM_005227.2 и NM_001008.3 соответственно, которые имеют только одно несоответствие нуклеотида с прямым или обратным праймером. Пара праймеров, созданная с помощью PRIMEGENS (пример 4), также показывает потенциальную непреднамеренную мишень только с одним несовпадением.Как было рассмотрено ранее, несоответствие одного нуклеотида (даже на 3’-конце) не оказывает существенного влияния на амплификацию мишени, и поэтому эти пары праймеров вряд ли будут специфичными для предполагаемых мишеней. Неспособность обнаружить несоответствие одного основания на (нуклеотидное основание G в примере 1) или вблизи 3′-конца (нуклеотидное основание C в примере 2) свидетельствует о недостатке использования только алгоритма локального выравнивания. Локальное выравнивание пытается максимизировать возвращаемую им оценку, поэтому оно не будет включать несоответствия в конце или (возможно) ближе к концу выравнивания, поскольку они уменьшат общую оценку [6].Другие случаи непреднамеренных мишеней включают 2 несовпадения (пример 3) или 5 несовпадений (пример 5) с одним из праймеров.

Рисунок 5

Примеры потенциальных непреднамеренных мишеней для пар праймеров, созданных QuantPrime и PRIMEGENS. Примеры мишеней извлечены из результатов проверки специфичности Primer-BLAST для пар праймеров, сгенерированных QuantPrime или PRIMEGENS (всего для QuantPrime и PRIMEGENS было идентифицировано 162 и 116 потенциальных непреднамеренных мишеней соответственно. Подробности см. в Таблице  2). Примеры праймеров соответствуют праймерам, подчеркнутым в дополнительных файлах 1 и 2.

Таким образом, мы заключаем, что Primer-BLAST способен обнаруживать потенциальные непреднамеренные мишени, которые пропускаются QuantPrime или PRIMERGENS в процессе скрининга специфичности.

Праймерная РНК – обзор

Синтез отстающей цепи

Синтез отстающей цепи в репликационной вилке начинается с РНК-праймера, который производится праймазой. Однако, поскольку отстающая цепь состоит из коротких фрагментов Оказаки, необходимо несколько РНК-праймеров в повторяющемся цикле инициации праймеров, удлинении ДНК-полимеразой и лигировании для запечатывания фрагментов (, рис. 2, ).Фрагменты Окадзаки имеют длину 1000–3000 оснований, а репликация идет на 400–1000 оснований s ^-1 , поэтому цикл реакций на отстающей цепи должен завершиться за несколько секунд. Реакции, необходимые для праймирования следующего фрагмента, удлинения существующего фрагмента и удаления праймеров с предыдущих фрагментов, могут происходить одновременно, что позволяет быстро завершить цикл отстающей нити.

Начиная со стадии элонгации этого цикла, холофермент полимеразы отстающей цепи синтезирует фрагмент Оказаки, который начинается с праймера, помеченного P2 ( Рисунок 2(a) ).В то же время геликаза, окружающая матрицу отстающей нити в разветвлении, раскручивает дуплекс перед холоферментом полимеразы ведущей нити. ОцДНК, генерируемая геликазой, вместе с оцДНК, оставшейся для репликации перед холоферментом полимеразы отстающей цепи, покрыта белками SSB.

Поскольку петля отстающей цепи продолжает расти из-за активности хеликазы и холофермента полимеразы отстающей цепи, 5’–3′-нуклеаза удаляет РНК-праймер (P1) и небольшое количество прилегающей ДНК из предыдущего фрагмента. ( Рисунок 2(b) ).Удаление этой ДНК, впервые добавленной к праймеру, может повысить точность репликации.

Когда холофермент полимеразы отстающей цепи завершает формирующийся фрагмент, создавая разрыв, зажим высвобождает полимеразу и остается на ДНК ( Рисунок 2(c) ). В E. coli этому высвобождению ядра полимеразы из β-зажима способствует С-концевой домен τ-субъединицы загрузчика зажима, действующий как разгрузчик. Нет никаких доказательств того, что для отключения зажима и полимеразы в системе Т4 необходим загрузчик зажима.Если полимераза не высвобождается на разрыве, она может продолжать синтезировать ДНК, замещая 5′-конец нижестоящего фрагмента, образуя лоскут. Однако все прокариотические 5′-нуклеазы, участвующие в удалении праймеров, также обладают активностью лоскутных эндонуклеаз, способных удалять эти смещенные нити. Разрывы, которые образуются между соседними фрагментами, запечатываются ДНК-лигазой.

Когда синтез формирующегося фрагмента завершен, праймаза, связанная с геликазой в разветвлении, создает РНК-праймер (P3), который будет использоваться для запуска следующего фрагмента ( Рисунок 2(c) ).Новый зажим загружается на праймер в системах E. coli и T4 с помощью загрузчика зажимов. Загрузчик зажима E. coli связан с двумя полимеразами, а также с геликазой в разветвлении, в то время как зажим рекрутируется из раствора. Эксперименты с разбавлением предполагают, что и зажим Т4, и загрузчик зажима должны быть получены из раствора для каждого цикла синтеза отстающей нити. Иногда праймаза создает праймер до того, как холофермент полимеразы отстающей цепи завершит предыдущий фрагмент Окадзаки.Это действует как сигнал, который вызывает преждевременное высвобождение полимеразы отстающей цепи, оставляя зазор между фрагментами, который в конечном итоге должен быть восстановлен путем загрузки другой полимеразы.

Наконец, полимераза отстающей цепи переносится на новый праймер (P3), нагруженный зажимом, для начала синтеза следующего фрагмента (, рис. 2(d) ). В случае T7 ДНК-связывающий домен праймазы связывает новый праймер и переносит его непосредственно на полимеразу с отстающей цепью. Одна и та же полимераза с отстающей цепью рециклируется от одного фрагмента Окадзаки к другому, удерживаясь на репликационной вилке за счет взаимодействия с зажимным загрузчиком в E.